新闻网讯 6月25日，国际生物学权威杂志Nucleic Acids Research在线发表了我校同济医学院药学院吴曈勃教授和同济医学院附属协和医院洪嘉欣博士、黄永明博士等人最近的研究成果“PAM-free hairpin target binding activates trans-cleavage activity of Cas12a”。研究发现了发夹结构的激活剂底物可以在无需PAM的辅助下特异性激活CRISPR-Cas12a，为Cas12a的活性调控提供新途径。

研究表明，双链DNA（dsDNA）作为Cas12a激活底物时，必须含有原间隔区邻近基序（PAM，5-TTTV-3），限制了底物的选择。免PAM激活底物的开发可拓宽Cas12a的应用范围，在分子诊断、生物传感器等其他相关领域具有重要意义。

吴曈勃团队报告了一种新型CRISPR-Cas12a激活底物，该底物为发夹结构，由环（任意序列）和茎（原间隔区dsDNA）组成。通过序列和结构分析，团队证明发夹结构的DNA底物无需PAM序列便可以激活Cas12a的反式切割活性，通过改变发夹位置、大小等可以调控Cas12a的活性。基于此，团队开发了由发夹结构DNA到dsDNA的变构策略，快速灵敏地检测非核酸靶标。该方法可有效避免背景泄漏和靶标丢失，无需复杂设计，实现了次氯酸和钙离子的灵敏检测。

药学院2022级博士生李小龙为第一作者。

原文链接：

https://academic.oup.com/nar/article/53/12/gkaf596/8173576